| Mobile | RSS

بررسی میکروسکوپی قارچ ها

شهریور ۲۵م, ۱۳۹۰ | No Comments | Posted in قارچ شناسی

در کارخانه جات تولید مواد غذایی برای بررسی موادغذایی نسبت به آلودگی های قارچی ، ابتدا ماده غذایی را در محیط کشت رشد می دهند. اگر ماده غذایی آلوده باشد میکروارگانیسم ها در محیط کشت رشد می کنند و اگر قارچی بر روی محیط رشد کرده باشد ، با بررسی ماکروسکوپی آن می توان جنس آن را تشخیص داد. اگر احتیاج به مشخص کردن گونه قارچ باشد باید آنرا با میکروسکوپ بررسی کنیم.

بعد از مشخص کردن دقیق جنس و گونه قارچ می توانیم اقدامات لازم جهت تخریب یا حذف آنها را اعمال کنیم و ماده غذایی را پاک سازی کنیم.

چیزی که حائز اهمیت است ، خسارت زایی قارچ ها بعد آلوده کردن مواد غذایی است ، پس بهتر است این آزمایشها در در بازه های زمانی کوتاه انجام گیرد تا از بروز خسارات اقتصادی بزرگ جلوگیری شود.

حال ما در اینجا نمونه ای از این آزمایش ها را بررسی می کنیم. در واقع فقط قارچ ها را از نظر میکروسکوپی بررسی می کنیم.

هدف از انجام این آزمایش بررسی میکروسکوپی پنی سیلیوم ، آسپرژیلوس و مخمر ساکارومایسس است.

 

تئوری آزمایش:

 

وسایل مورد نیاز برای انجام آزمایش عبارتند از :

لام ، لامل ، آنس حلقوی ، محلول KOH ، محلول لاکتو فنول ، کریستال ویوله ، میکروسکوپ ، روغن سدر ، نمونه هایی از پنی سیلیوم ، آسپرژیلوس و ساکارومایسس

 

روش کار:

بعد از آماده کردن وسایل مورد نیاز می توانید آزمایش را شروع کنید. ابتدا یک لامل بر داشته و یک قطره KOH روی آن می ریزیم. با استفاده از آنس حلقوی استریل شده ، مقداری از کپک های سطح پلیت حاوی کپک آسپرژیلوس برداشته و در قطره KOH به آرامی تکان می دهیم تا کپک ها در قطره پخش شوند. این کار باید با دقت و به آرامی انجام شود تا به کپک ها آسیب نرسد. یک لامل برداشته و روی آن قرار می دهیم و اسلاید آماده شده را با بزرگ نمایی ۴۰X مشاهده می کنیم.

یک بار دیگر همین کار را با محلول لاکتوفنول تکرار می کنیم یعنی به جای محلول KOH از محلول لاکتوفنول استفاده می کنیم و با همان بزرگ نمایی مشاهده می کنیم.

مراحل قبل را تنها با محلول لاکتوفنول ، برای کپک پنی سیلیوم انجام می دهیم و بعد از تهیه اسلاید آنرا با بزرگ نمایی ۴۰X می توانیم مشاهده کنیم.

تهیه اسلاید مخمر ساکارومایسس با دو نمونه قبلی متفاوت است. برای این کار یک قطره سرم فیزیولوژی روی لام می ریزیم و مخمر را از پلیت حاوی آن به وسیله آنس حلقوی برداشته و در قطره سرم پخش می کنیم. آنرا روی شعله میگیریم تا تثبیت شود. سپس ماده رنگی کریستال ویوله را روی آن می ریزیم و بعد ۳۰ثانیه آنرا با آب مقطر شستشو می دهیم. لام را کناری میگذاریم تا خشک شود البته برای افزایش سرعت کار می توانیم از نور لامپ برای خشک کردن استفاده کنیم. پس از خشک شدن ، آنرا زیر میکروسکوپ قرار می دهیم و یک قطره روغن سدر روی آن می ریزیم و با بزرگ نمایی ۱۰۰X مشاهده می کنیم.

شرح عملی آزمایش:

برای انجام این آزمایش از پلیت هایی که خودمان در هفته پیش آماده کرده بودیم ، استفاده کردیم. البته نمونه مخمر را از پلیت گروه دیگری که مخمر در آن رشد بهتری داشت برداشتیم.

ابتدا یک لام تمیز را برداشتیم و یک قطره KOH به وسیله قطره چکان روی آن قرار دادیم. آنس حلقوی رابا شعله استریل کردیم ، سپس از پلیت حاوی کپک آسپرژیلوس که مربوط به نمونه ی نان بود ، توسط آنس حلقوی مقداری از کپک را برداشتیم و در قطره ی KOH پخش کردیم و آنرا با بزرگ نمایی

۴۰ X بررسی کردیم. کپک آسپرژیلوس دارای ساختاری شبیه گل بود ، که دارای کنیدیوفورهای طویل و تقریبا بی رنگی داشت و در انتهای هر کنیدیوفور بر آمدگی کروی و یا بیضی شکلی به صورت حباب مشهده کردیم که به آن ویسل می گویند.

با دیگر مراحل بالا را انجام دادیم ، با این تفاوت که به جای محلول KOH از محلول لاکتوفنول استفاده می کنیم که باعث رنگی شدن کپک ها شده و مشاهده را بهتر و واضح تر می کند.

 برای مشاهده کپک پنی سیلیوم موجود در نمونه آلوده ی رب  نیز مانند روش بالا از کپک پنی سیلیوم گسترش تهیه کردیم، با این تفاوت که فقط از محلول لاکتوفنول استفاده می کنیم.

پس از تهیه گسترش آنرا زیر میکروسکوپ قرار دادیم و با بزرگ نمایی ۴۰X  بررسی کردیم. ساختاری شبیه جارو دیده شد و کنیدیوفورها به صورت ساده ، راست و طویل بر روی میسیلیوم ها قابل مشاهده بودند

برای تهیه ی اسلاید مخمر ساکارومایسس ، ابتدا یک قطره سرم فیزیولوژی روی لام ریختیم و با استفاده از آنس حلقوی استریل ، مقداری ار کلونی های تشکیل شده در سطح محیط کشت را برداشتیم و در سرم حل و آنرا روی لام پخش کردیم. لام را روی شعله گرفتیم و آنرا به صورت دورانی

حرکت دادیم تا تثبیت شود. پس از تثبیت روی آن به مدت ۳۰ ثانیه کریستال ویوله ریختیم و بعد از این مدت زمان آنرا با آب شستشو دادیم. لام را زیر نور لامپ قرار دادیم تا خشک شود. پس از خشک شدن ، لام را زیر میکروسکوپ قرار دادیم و روی آن یک قطره روغن سدر ریختیم و با عدسی ۱۰۰X  

آنرا بررسی کردیم. از نظر شکل ظاهری این مخمر ها به شکل بیضوی و کروی بودند و زنجیره هایی را به دنبال هم تشکیل می دهند که ایجاد یک میسیلیوم کاذب ابتدایی را به دنبال دارند.

Leave a Reply 2915 views, 1 so far today |

Leave a Reply


three + 5 =



Fatal error: Call to undefined function get_flickrRSS() in /home3/pardisho/public_html/wp-content/themes/Digital Statement/footer.php on line 13