| Mobile | RSS

رنگ آمیزی بافتهای گیاهی

خرداد ۲۳ام, ۱۳۹۰ | No Comments | Posted in زیست شناسی گیاهی

رنگ آمیزی بافت های گیاهی

 1 _ جهت بی رنگ کردن بافت، برشهای تهیه شده را در آب ژاول۲۰%   به مدت ۱۵ الی ۲۰ دقیقه بسته به نوع بافت از لحاظ نرم بودن آن و یا خشبی بودنش قرار می دهیم تا اینکه آماده مراحل بعدی رنگ آمیزی شود.

۲ _  سپس برشها را با آب مقطر شستشو داده که می توانید به دو شیوه عمل نمائید،  یا بافتها را بوسیله قلم مو کوچک از شیشه ساعتی محتوی آب ژاول به شیشه ساعتی دیگر که محتوی آب مقطر است انتفال دهید و یا اینکه با یک عدد قطره چکان آب ژاول را از شیشه ساعتی مذکور تخلیه کنید. در این مرحله ترجیحاً عمل شستشو را دوبار انجام دهید. چرا که در صورت باقی ماندن آب ژاول در بافت گیاهی، ماندگاری آن کم خواهد شد.

۳ _ در این مرحله بافتهای گیاهی را در اسید استیک ۱۰% به مدت ۲ دقیقه به منظور ترکیب با آب ژاول باقی مانده در بافت گیاهی قرار می دهیم. قابل توجه است که اگر بافت به مدت طولانی در اسید استیک بماند متلاشی می گردد.

۴ _ حال بافت گیاهی آماده رنگ آمیزی شده است و تک تک بافتها را به مدت ۵ الی ۱۰ در ثانیه در متیلن آبی قرار می دهیم. در این مرحله تک تک بافتها را بر روی قلم مو کوچک قرار داده و سپس به آرامی قلم مو حامل بافت را به درون محلول متیلن آبی (۵ تا۱۰ ثانیه) فرو می بریم و سریعاً بافت را به شیشه ساعتی محتوی آب مقطر منتقل می کنیم.

۵ _ در این مرحله بافتها را در آب مقطر شستشو می دهیم.

۶ _ کلیه بافتها را در الکل اتانول ۷۰ % به مدت ۳ الی ۵ دقیقه  قرار داده تا رنگ اضافی متیلن آبی شسته شود و تنها بافتهای چوبی و لیگنینی رنگ آبی را حفظ کنند.

۷ _  در این مرحله شستشو را به خوبی انجام می دهیم.

۸ _ سپس کلیه بافتها را داخل محلول کارمن جهت رنگ آمیزی بافتهای زنده و عموماً سلولزی به مدت۱۰ الی ۱۵ دقیقه قرار می دهیم.

۹ _ در انتها بافتها را با آب مقطر فراوان شستشو می دهیم.

۱۰_ حال نمونه آماده مشاهده و بررسی است که با قرار دادن یک قطره آب مقطر بر روی لام و سپس چند تا از برشهای تهیه شده را با قلم مو برروی آن قرار داده و یک لامل به طور مورب روی لام می اندازیم تا حباب هوای کمتری بگیرد، سپس بافت را زیر میکروسکوپ نوری مطالعه می کنیم .

۱۱ _ در صورت نیاز به نگهداری این نمونه به جای یک قطره آب مقطر از گلیسیرین استفاده می کنیم. دور آنرا با لاک ناخن جهت عدم نفوذ گرد و خاک و مواد دیگر می پوشانیم. اصولاً برای ماندگاری بیشتر از یک قطره چسب کانادابالزام استفاده می شود ولی بعلت گران بودنش از آن صرف نظر کرده ایم.

۱۲ _ در انتها پس از آنکه نمونه میکروسکوپی کاملاً خشک گردید آنرا داخل جعبه لام نگهداری می نمائیم .

طرز تهیه آب ژاول

در آزمایشگاه جهت بیرنگ کردن بافتهای گیاهی و یا جانوری از آب ژاول استفاده میشود . اما میتوانید از آب ژاول تجاری ( وایتکس ) که به نسبت یک به پنج رقیق شده است، استفاده کنید . برای تهیه آب ژاول به شیوه زیر عمل میکنیم :

۴۰ گــرم کلروردشو (Ca(Clo)2 + Cacl2 ) و ۲۰ گرم کربنــات سدیم در یک لیتــر آب مقطر که به مدت ۱۰ دقیقه در دمای ۵۰ الی ۶۰ درجه سانتیگراد حرارت داده میشود . سپس محلول بدست آمده را صاف میکنیم.

 

H2O + Ca(Clo)2 + Cacl2 + 2Na2Co3              2Naclo + 2Nacl + 2Caco3

    آب ژاول

 

طرز تهیه محلول لوگل یا ید یدوره

۵/۰ گرم ید فلزی با ۱ گرم یدور پتاسیم در ۱۰۰ سی سی آب مقطر ، محلول لوگل بدست می آید . که یکی از معرفهای رنگی دانه نشاسته است و آنرا به رنگ آبی تا بنفش در می آورد.

 

I2 + IK + H2O                  محلول لوگل

طرز تهیه محلول کارمن زاجی  

۱ گرم پودر کارمن با ۵ گرم زاج سفید ( KAL(SO4)2.12H2O ) در ۱۰۰ سی سی آب مقطر که به مدت ۳۰ دقیقه می جوشانیم حاصل میشود سپس بعد از ۲۴ ساعت محلول حاصل را صاف کرده و به آن ۵/۰ گرم اسید فنیک جهت جلوگیری از کپک زدن اضافه میکنیم .

 

طرز تهیه محلول متیلن آبی

۱ گرم پودر وردومتیل را در ۱ لیتر آب مقطر حل مینمائیم

Leave a Reply 7240 views, 1 so far today |

Leave a Reply

Time limit is exhausted. Please reload the CAPTCHA.

1R8A94601R8A94661R8A93781R8A9319Ryan's Pub, St Julian, December 25, 2016Gorgeous Gorgs, Sliema, December 24, 2016The 11:40 Rogue One Show on Eden in St Julian, December 28, 2016Ariëlla 006Lu #XAriëlla 005